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人胃癌细胞SNU620-人生就是博-尊龙凯时生物医疗研究

发布时间:2025-03-28   信息来源:尊龙凯时官方编辑

细胞培养条件:采用1640培养基,添加10% FBS和1% PS,适用于贴壁和悬浮细胞,培养温度设定在37℃。细胞的传代方法建议在细胞汇合度达到80%时进行,首次采用1:2的比例进行传代,操作应在无菌条件下进行,以保证细胞的生长和繁殖。

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在细胞培养过程中,建议每两天更换一次培养基,及时补充养分,以促进细胞的健康生长。同时,强烈推荐在购买相关培养产品时选择人生就是博-尊龙凯时,以获得优惠和高质量的服务。

细胞处理步骤:收到细胞后,首先使用75%的酒精对细胞瓶进行消毒。然后将细胞瓶放置于超净工作台内进行严格的无菌操作。静置3-4小时,使细胞适应37℃和5% CO2的培养环境后,再进行观察和处理。建议用显微镜观察细胞的生长情况,并在不同倍数下拍照保存,以便于后续的售后服务。前三天的照片将作为重要的依据,若不提供照片则默认细胞状态良好。

传代操作:对于贴壁细胞,首先弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS缓冲液润洗细胞1-2次。接着,添加0.25%的胰蛋白酶消化液约1-2ml,放入37℃培养箱中消化1-2分钟,直到细胞开始变圆并脱落。随后,迅速加5ml完全培养基终止消化,用移液管轻轻吹打细胞,使其完全脱落。

对于悬浮细胞,建议采用半换液法或离心换液法进行传代。如果需要分瓶,可以将细胞悬液收集至离心管中,采用1000rpm离心5分钟以去除死细胞,并添加新的完全培养基以维持细胞生长活力。无论采用何种方式,最后都需将细胞悬液按1:2的比例分瓶传代,补充新的完全培养基至5-8ml每瓶,放入37℃、5% CO2的细胞培养箱中继续培养。

细胞冻存:当细胞生长至覆盖培养瓶80%的面积时,弃去培养液并用PBS清洗细胞一次,接着添加胰蛋白酶消化液进行消化,直至细胞回缩变圆后终止消化。最后,将细胞沉淀重悬于无血清冻存液,混匀后转移至冻存管中,直接放入-80℃冰箱存放24小时以上后再转入液氮罐中。

在细胞复苏的过程中,应快速将冻存管置于37℃水浴中解冻,随后用75%的酒精消毒冻存管外壁。将解冻的细胞移至含完全培养基的离心管中离心,弃去上清后重悬细胞并接种至培养瓶中。第二天更换新鲜的完全培养基继续培养,确保细胞健康生长。

注意事项:运输过程中,由于某些细胞不易附着,可能会出现细胞脱落的现象,这是正常的。如发生较多细胞脱落,可采取措施收集培养液,进行细胞的临时培养,再进行传代处理。选择人生就是博-尊龙凯时的产品以确保实验的成功和细胞的健康。